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            論文編號 202105-179
            論文題目 靶向AFP特異親和小體ZAFP D2多聚體蛋白的設計、制備及應用
            文獻類型
            收錄
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            靶向AFP特異親和小體ZAFP D2多聚體蛋白的設計、制備及應用

            首發時間:2021-05-25

            劉娟娟 1    2   

            劉娟娟(1987-),女,主要研究方向:蛋白質工程

            蔣怡 1    陳林 1    陳家沖 1    韓帥峰 1    田杰 1    趙青 1   

            趙青,女,講師、碩導,主要研究方向:功能多肽的研發、制備與應用

            • 1、天津科技大學生物工程學院,天津 300457
            • 2、中國科學院天津工業生物技術研究所,天津 300308

            摘要:甲胎蛋白(AFP)是一種診斷原發性肝癌特異性較強的腫瘤標志物,臨床上常用于原發性肝癌的早期診斷。前期利用噬菌體展示技術淘選出了靶向AFP的親和小體分子ZAFP D2。為實現特異親和力的提升,本研究基于蛋白質分子設計原理,設計了ZAFP D2親和小體的同分子二聚體、三聚體和四聚體,并組合使用大腸桿菌表達系統和親和層析技術對多聚體蛋白進行制備,隨后鑒定了二聚體(ZAFP D2)2蛋白與AFP的親和力是單體蛋白的2倍,而三聚體(ZAFP D2)3和四聚體(ZAFP D2)4蛋白特異親和活性較單體有所降低。最后利用ZAFP D2多聚體與AFP多克隆抗體建立AFP夾心ELISA檢測方法,其中以二聚體(ZAFP D2)2蛋白作為捕獲元件明顯提高了夾心ELISA檢測甲胎蛋白的靈敏度。本研究工作為甲胎蛋白臨床檢測新技術的開發提供了新思路。

            關鍵詞: 腫瘤標志物 甲胎蛋白 親和小體 多聚體 夾心ELISA

            For information in English, please click here

            Design,preparation and application of specific affibody ZAFP D2 polymer protein targeting AFP

            LIU Juanjuan 1    2   

            劉娟娟(1987-),女,主要研究方向:蛋白質工程

            JIANG Yi 1    CHEN Lin 1    CHEN Jiachong 1    HAN Shuaifeng 1    TIAN Jie 1    ZHAO Qing 1   

            趙青,女,講師、碩導,主要研究方向:功能多肽的研發、制備與應用

            • 1、School of biotechnology,Tianjin University of Science & Technology,Tianjin 300457
            • 2、 Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin, 300308

            Abstract:Alpha-fetoprotein (AFP) is a tumor marker with strong specificity in the diagnosis of primary liver cancer, which is often used in the early diagnosis of primary liver cancer.ZAFP D2, an affinity molecule targeting AFP, has been previously screened based on phage display technology.In order to improve the specific affinity, homolecular dimer, trimer and tetramer of ZAFP D2 affinity body were designed based on the principle of protein molecular design, and the designed polymeric protein was prepared by using a combination of Escherichia coli expression system and affinity chromatography.The affinity between dimer (ZAFP D2)2 protein and AFP was twice that of monomer protein, and the specific affinity activity of trimer (ZAFP D2)3 and tetramer (ZAFP D2)4 protein was lower than that of monomer protein.Then, ZAFP D2 polymer and AFP polyclonal antibody were used to establish an AFP sandwich ELISA assay, in which the dimer (ZAFP D2)2 protein was used as the capture element to improve the sensitivity of sandwich ELISA for the detection of alpha-fetoprotein.This work provides a new idea for the development of new techniques for clinical detection of alpha-fetoprotein.

            Keywords: Tumor markers Alpha fetoprotein Affibody Polymer Sandwich ELISA

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            引用

            導出參考文獻

            .txt .ris .doc
            劉娟娟,蔣怡,陳林,等. 靶向AFP特異親和小體ZAFP D2多聚體蛋白的設計、制備及應用[EB/OL]. 北京:中國科技論文在線 [2021-05-25]. http://www.c1gkrice.com/releasepaper/content/202105-179.

            No.****

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